在現代分析化學領域,超高效液相色譜儀已成為重要的一種分析手段。它具有高精度、高靈敏度、高分辨率等優點,可以對各種化合物進行快速、準確地分離、鑒定和定量,廣泛應用于醫藥、食品、環保、生物等領域。
一、工原理作
利用溶液在流動載體(流動相)的作用下通過固定相柱進行分離的方法。流動相是由溶劑組成的混合物,將樣品注入到流動相中一端的進樣口處,經過柱內反應后,被分離出來的化合物逐一通過檢測器并記錄下其信號。通常包括進樣器、流量控制裝置、柱子、檢測器和數據處理系統等主要部件。
二、結構特點
1、皖儀自制,與?作站?縫鏈接,集優的關鍵部件,?精度計量泵,極?提升了進樣精確度。
2、極坐標的設計,多種進樣?式可選,滿?各種客?使?需求,配有輔助?泵,可選擇制冷模式,智能照明設計,便于觀察。
2、柱溫箱:
加熱-制冷雙向風浴控溫,控溫柔和,受熱均勻,穩定性高;
提供2路“250mm色譜柱+保護柱”安裝位,滿足絕大多數用戶使用需求。
3、紫外檢測器:高精度反射鏡片,1800線閃耀光柵,保證極低的雜散光和極大的線性范圍。
4、工作站:具備本地部署和網絡部署功能,滿足不同規模用戶的需求。
三、使用優點
1、高效性:UPLC使用更小的固定相顆粒和優化的色譜柱設計,使得樣品在色譜柱內的交互作用時間更短,從而實現更高的分離效率和更快的分析速度。這一特點使得UPLC在處理復雜樣品時具有顯著優勢。
2、高靈敏度:由于UPLC的分離效率高、噪聲信號低,因此能夠檢測到樣品中更低濃度的組分,提高了分析的靈敏度。
3、靈活性:UPLC可以根據不同的實驗需求選擇不同的固定相材料和流動相組成,從而實現對不同樣品中不同成分的分離和檢測。此外,還可以通過改變柱溫、流速等參數來優化分離效果。
4、易于操作:UPLC通常配備有簡單易用的操作系統和軟件,用戶可以通過觸摸屏或電腦軟件進行控制和數據處理,大大降低了實驗操作的難度和時間成本。
四、操作流程一般包括以下步驟:
1、準備樣品:將待測樣品制備好,通常是通過溶解、萃取、分離或者其他方法得到。
2、準備色譜柱:選擇合適的色譜柱,并進行初步的洗滌和平衡,確保柱子狀態良好。
3、調整流動相:選擇合適的流動相,調整pH值和緩沖鹽濃度等參數,以獲得最佳的柱效和分離效果。
4、樣品進樣:使用自動進樣器或手動注射器將樣品注入色譜柱中。
5、進行分離:開啟色譜儀,按照設定的條件進行分離,例如執行溫度梯度或梯度洗脫等操作。
6、檢測分離結果:利用檢測器對分離后的組分進行檢測,并記錄數據。
7、數據處理與分析:使用數據處理軟件對獲得的數據進行處理和分析,例如定量或鑒定分析。
8、清洗設備:在操作完成后,必須清洗色譜柱和進樣器等設備,確保下一次使用時狀態良好。
五、提高分析速度與準確度方面的作用
1、在提高分析速度方面的作用
分析速度是科研工作中非常重要的一個指標,尤其是在處理大量樣品或進行高通量篩選時。超高效液相色譜儀憑借其優化的色譜柱和流動相系統,顯著提高了分析速度。
首先,更小的顆粒度和更短的色譜柱長度使得樣品在色譜柱中的傳質速度加快,分離時間大大縮短。其次,通過優化流速和梯度條件,超高效液相色譜儀能夠在保證分離效果的前提下,進一步提高分析速度。此外,還具備自動化操作的特點,減少了人為因素的干擾,提高了工作效率。
2、在提高分析準確度方面的作用
除了分析速度外,分析準確度也是色譜分析技術中至關重要的一個方面。通過一系列技術手段,顯著提高了分析的準確度。
首先,高靈敏度的檢測器和精密的數據處理系統使得超高效液相色譜儀能夠準確檢測樣品中的微量成分,并對其進行定量分析。其次,通過選擇合適的色譜柱和流動相條件,可以實現對復雜混合物中各組分的有效分離,減少了干擾因素的影響。此外,還具備高穩定性和重復性的特點,使得分析結果更加可靠。
六、應用案例
1、在藥物研發領域可用于藥物的純度分析、雜質檢測以及藥物代謝產物的鑒定等。通過超高效液相色譜儀的分析,研究人員可以了解藥物的化學組成和性質,為藥物的研發和優化提供重要依據。
2、在食品安全領域,可用于食品中添加劑、農藥殘留以及有害物質的檢測。通過對食品樣品的快速、準確分析,可以保障食品的安全性和質量。
3、在環境監測領域,超高效液相色譜儀可用于水體、土壤和大氣中污染物的檢測和分析。通過對環境樣品的連續監測和分析,可以了解環境污染的狀況和趨勢,為環境保護和治理提供數據支持。